【產(chǎn)品信息】

冰凍切片實(shí)驗(yàn)步驟
1、 冰凍切片固定：冰凍切片從冰箱拿出來(lái)復(fù)溫，晾干水分，純甲醇固定10min，待純甲醇稍干后置于烤箱5min，然后置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。
2、 染色：冰凍切片稍甩干后用組化筆在組織周?chē)?huà)圈（防止抗體流走），在圈內(nèi)滴加BODIPY染液濃度
1:1000（濃度可根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果調(diào)整），避光恒溫箱37°孵育30min。
3、 DAPI復(fù)染細(xì)胞核：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加
DAPI染液，避光室溫孵育10min。
4、 封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。
5、 鏡檢拍照：切片于尼康倒置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。
（紫外激發(fā)波長(zhǎng)330-380nm，發(fā)射波長(zhǎng)420nm；FITC綠光激發(fā)波長(zhǎng)465-495nm，發(fā)射波長(zhǎng)515-555 nm；CY3紅光激發(fā)波長(zhǎng)510-560，發(fā)射波長(zhǎng)590nm）